① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人卵巢微血管内皮细胞

英文名称：Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells

组织来源：卵巢组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人卵巢微血管内皮分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7～9微米，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的微血管由2～3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的微血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现，不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别，而同是微血管内皮细胞，它们又存在器官和组织的特异性。

公司实验室分离的人卵巢微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人卵巢微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)检测试剂盒 ，英文名： PKCη ELISA Kit

N end middle Osteocalcin (N-MID-OT) ELISA Kit 人N端中段骨钙素(N-MID-OT)检测试剂盒

Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCXCR3(MouseCXC-chemokinereceptor3)ELISAKIT小鼠CXC趋化因子受体3

细胞色素P450亚酶CYP2E1(MFC)活性荧光定量检测试剂盒20次

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKiatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit大鼠IX(FIX)检测试剂盒规格：96T/48T

FGF21重组小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein

A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽

CANT1重组人 CANT1 蛋白 (Fc 标签) Protein

CHI3L2 Protein Human 重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

FGFR4 Protein Rat 重组大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白

蛋白激酶Cη(PKCη)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

CHI3L2 Protein Human 重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

NCSTN重组小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein

IL10RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 标签)

VAMP3重组人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein

小鼠糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ovarian cancer marker-CA125 CA125ELISA 人卵巢癌标志物CA125检测试剂盒

Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 人脱氧尿三0酸(DP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Chickenviruseeritis,DEV检测试剂盒鸡病毒性肠病毒(DEV)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞VEGF蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit小鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)检测试剂盒规格：96T/48T

人卵巢微血管内皮细胞小鼠胎盘催乳素   英文名称：   Mouse placeal lactogen   规格：      英文缩写：   PL

小鼠纤溶酶原激活剂抑制因子1   英文名称：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 1   规格：      英文缩写：   PAI-1

小鼠纤溶酶原激活剂抑制因子2   英文名称：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 2   规格：      英文缩写：   PAI-2

小鼠松弛素   英文名称：   Mouse Relaxin   规格：      英文缩写：   RLN

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用