① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人结肠平滑肌细胞

英文名称：Human Colonic Smooth Muscle Cells

组织来源：结肠组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人结肠平滑肌分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌；结肠运动少而缓慢，对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展，对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平，要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞，由于影响因素单一，是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。

公司实验室分离的人结肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人结肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠蛋白激酶N2(PKN2)检测试剂盒 ，英文名： PKN2 ELISA Kit

Na+/H+ exchanger 3 (NHE3) ELISA Kit 人Na+/H+交换体3(NHE3)检测试剂盒

Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAkit 大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCyclin-D2ELISAKit大鼠细胞周期素D2

细胞色素P450亚酶CYP2C9(CEC)活性荧光定量检测试剂盒20次

RatFibrinogen,FbgELISAKit大鼠血纤蛋白原(Fbg)检测试剂盒规格：96T/48T

FIGF重组大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 标签) Protein

ets1/E26 (E-twenty six 1 0.5mgets1/E26 (E-twenty six 1) Ets转录因子家族ets1抗原

IL12A & IL12B重组人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

CHEK1 Protein Human 重组人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 标签)

CTSE Protein Mouse 重组小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白

ets1/E26 (E-twenty six 1 0.5mgets1/E26 (E-twenty six 1) Ets转录因子家族ets1抗原

CHEK1 Protein Human 重组人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 标签)

FIGF重组大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 标签) Protein

CTSE Protein Mouse 重组小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白

IL12A & IL12B重组人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 人硫氧还蛋白还原酶(xR)检测试剂盒

Humanindoleamine2,3-dioxygenase,IDOELISAKit 人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGF检测试剂盒鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞TSH-BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseE-SelectinELISAKit小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)检测试剂盒规格：96T/48T

人结肠平滑肌细胞小鼠糖皮质激素   英文名称：   glucocoicoid   规格：      英文缩写：   GC

胶质细胞源神经营养因子   英文名称：   glial cell line-derived neuoophic factor   规格：      英文缩写：   GDNF

小鼠生长因子   英文名称：   growth hormone   规格：      英文缩写：   GH

小鼠心肌转录因子GATA3   英文名称：   cardiac muscle anscription factor GATA3   规格：      英文缩写：   GATA3

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用