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操作因素对抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒实验的影响
点击次数:777 更新时间:2017-09-20

测定步骤:固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。

ELISA试剂盒操作较繁杂,在操作中应注意以下5个方面。

1. 随着病情的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发生大幅波动,因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中,标本适当稀释还可降低非特异性反应。

2. 加样一般使用加液器,在ELISA试剂盒中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物、底物和终止液时则不需更换吸嘴。

3. 在成批手工检测中,还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原抗体反应和酶促反应时间不一致,对竞争法及定量检测影响很大,不注意可能会导致错误结果或定量不准。

4. 洗涤是ELISA试剂盒操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物,终止抗原抗体反应,除去标本中与反应无关的成分、游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板,前者洗涤质量较好,各反应孔洗涤效果均一,批内、批间差异小,手工洗板应注意控制各孔洗涤效果,差异不宜太大。

5. 准确判定结果须使用测读仪,比色法判读可选择单波长或双波长,根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反应孔的吸光度值。酶标仪具有良好的重复性。
25-羟基-原人参二醇    25-OH-Protopanaxdiol    ≥97%    纯度:
25-羟基-原人参三醇        25-OH-Protopanaxtiol    ≥97%    纯度:
25-羟基-原人参三醇    25-OH-Protopanaxtiol    ≥97%    纯度:
2-羟基泽兰内酯    2-Hydroxyeupatolide    ≥97%            纯度:
2-O-没食子酰基金丝桃苷            2-O-galloylhyperin    ≥98%            纯度:
丁香醛    3,5-Dimethoxy-4-hydroxybenzaldehyde    ≥97%    纯度:
3,6’-二芥子酰基蔗糖    3,6’-Disinapoyl sucrose    ≥95%    纯度:
3’-甲氧基    3’- Methoxy Puerarin    ≥99%    纯度:

 

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