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如何正确使用GSH 酶联免疫分析试剂盒?
点击次数:435 更新时间:2020-02-25
如何正确使用GSH 酶联免疫分析试剂盒?
GSH 酶联免疫分析试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)的含量。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
24μg/L 5号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μ1 标准品稀释液
12μg/L 4号标准品 150μl 的5号标准品加入 150μl 标准品稀释液
6μg/L 3号标准品 150μl 的4号标准品加入 150μl 标准品稀释液
3μg/L 2号标准品 150μl 的3号标准品加入 150μl 标准品稀释液
1.5μg/L 1号标准品 150μl 的2号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μ1,空白孔除外。GSH 酶联免疫分析试剂盒
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。GSH 酶联免疫分析试剂盒
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