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E2检测ELISA试剂盒竞争法的操作步骤
点击次数:893 更新时间:2018-06-12

竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量成反比。

操作步骤如下:

(1)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。
(2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达zui充分的量。洗涤。
(3)加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原zui多,故颜色zui深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。

ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。

1000ml Mould and Yeast Chromogenic Medium 用于霉菌和酵母菌的显色培养 霉菌和酵母菌显色培养基

250克 PDB 用于霉菌和酵母菌的培养 马铃薯葡萄糖肉汤

250 Salt Czapek Dox Agar 用于霉菌和酵母菌的计数(GB标准) 高盐察氏琼脂  

250克 Salt Czapek Dox Agar 用于霉菌和酵母菌的计数 高盐察氏培养基

250 Potato Dextrose Agar 用于霉菌、酵母菌计数(GB标准) 马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)  

250 Rose Bengal Medium 用于霉菌、酵母菌计数 玫瑰红钠琼脂   

250 YM Agar 用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分离培养(Acumedia方法) YM琼脂

250 Tryptic Soy Fast Green Agar 用于滤膜细菌总数的测定和分离培养(NEOGEN方法) 胰胨大豆胨固绿琼脂

250g m-Endo Agar,LES 用于滤膜细菌计数(Merck方法) LES Endo 琼脂

250 EF-18 Agar 用于滤膜法检测食品中沙门氏菌(SN/T1059.1) EF-18 琼脂

250克 M-Enerococcus Agar 用于滤膜法或直接平板法,从自来水、食品或其他标本中分离肠球菌 M-肠球菌琼脂

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