具有活络、特异、简略、快速、安稳及易于自动化操作等特色。不只适用于临床标本的查看,并且因为一天之内能够查看几百乃至上千份标本,因而,也适合于血清流行病学调查。ELISA法是免疫确诊中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的流行症、寄生虫病及非流行症等方面的免疫确诊。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,依据现已运用的成果,本法不只能够用来测定抗体,并且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种前期确诊的杰出办法。
操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔参加待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,参加纯细胞裂解液100μl。 (2)酶标板置4℃,包被。
(3)洗板:吸干孔内反响液,用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后,即甩去),之后将洗刷液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇摆。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗刷3-4次。
(4)阴性对照孔每孔参加PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔参加1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,悄悄混匀10s,置37℃暗处反响15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反响。
(12)别离测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终究测得的OD值为两者之差(W1-W2),以削减由容器上的划痕或指印等形成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,核算S/N值。S/N≥2.1为阳性断定规范。
Isosorbide (75% solution) 1g 异75%溶液标准品 652-67-5
Isotretinoin 200mg 标准品 4759-48-2
Isoxsuprine Hydrochloride 200mg 异舒普林盐酸盐标准品 579-56-6
Isradipine 200mg 依拉地平标准品 75695-93-1
Itraconazole 100mg 标准品 84625-61-6
Ivermectin 200mg 依维菌素标准品 70288-86-7
Kawain 200mg 醉椒素标准品 500-64-1
KDN 100mg 凯迪恩标准品 22594-61-2
Ketoconazole 200mg 标准品 65277-42-1
Ketoprofen 200mg 标准品 22071-15-4
Ketorolac Tromethamine 200mg 标准品 74103-07-4
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