水溶液中的氨基酸为兼性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。甲醛可与氨基酸上的—N+H3结合，形成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2 等羟甲基衍生物，使N+H3上的H+游离出来，这样就可以用碱滴定N+H3放出H +，测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。

    若样品中只含有单一的已知氨基酸，则可由此法滴定的结果算出氨基酸的含量。若样品中含有多种氨基酸（如蛋白质水解液），测不能由此法算出氨基酸的含量。 

    与甲醛作用后，生成的化合物不稳定，导致滴定后结果偏低；含酚基结构，导致滴定结果偏高。 

测定氨基酸含量的材料、试剂与器具 

（一）试剂 

1、0.5%酒精溶液 

称0.5g溶于100ml60%酒精中。 

2、0.05%溴蓝溶液 

取0.05溴麝行草酚蓝溶于100ml 20%乙醇溶液中。 

3、1%溶液 

取1g溶于100ml蒸馏水。 

4、标准0.100mol/L 氢氧化钠溶液 

5、中性甲本醛溶液 

    取50ml，加0.5%指示剂约3ml，滴加0.1mol/LnaOH溶液，使溶液呈微粉红色，临用前中和。 

（二）实验器具 

1、锥形瓶 2、碱式滴定管 

3、 移液管洗耳球 4、天平 

5、容量瓶 6、试剂瓶 

7、量筒 8、玻棒与烧杯 

    注意事项 ：利用甲醛滴淀法可以用来测定蛋白质的水解程度。随着蛋白质水解度的增加，滴定值也增加，当蛋白质水解完成后，滴定值不再增加。

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