操作步骤：

1）运用前，将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡，发生加样上的差错。

2）依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定，能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内。

3）参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的标记的抗体。盖上膜板，悄悄振动混匀，37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。

5）每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，悄悄振动混匀，37℃温育30分钟。

6）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。

7）每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀，37℃温育10分钟。防止光照。

8）取出酶标板，敏捷参加50ul停止液，参加停止液后应当即测定成果。

9）在450nm波利益测定各孔的OD值。

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