操作步骤

 

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

ADM 肾上腺髓质素抗体
Adenosine A3 Receptor 腺苷受体A3抗体
ADRA2 ADRA2肾上腺素能受体2抗体
ADRB1 肾上腺素能受体β1抗体
ADRB2 肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体
AGEs 晚期糖基化终末产物抗体
Aggrecan1 软骨蛋白聚糖抗体
ALAS-E 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗体
ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2抗体
ARIP2B 激活素受体2B抗体
AIMP2 AIMP2抗体
ALAS1 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
alpha Defensin 1 防御素α1/3抗体
ABCG4 ABC膜转运蛋白抗体
ATEXPA10 植物延长蛋白
A Raf A-Raf抗体
Phospho-A Raf 磷酸化A-Raf抗体
AMPD3 红细胞腺苷脱氨酶3抗体

 

 

 

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